簡(jiǎn)要描述:Cellulose DE-52 纖維素 DE-52 二乙氨基乙基纖維素DE52 別名 DEAE纖維素52;離子交換纖維素 英文名 Cellulose-DEAE,DE 52 分子式 離子交換基團(tuán)-OCH2CH2N(C2H5)2 分子量 為已經(jīng)過(guò)泡脹的二乙氨基乙基纖維素,為中等堿度陰離子交換劑。對(duì)高相對(duì)分子質(zhì)量聚合電解質(zhì)有較好的解析。游離堿型。1kg中約含有300g干燥品。容量
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DE-32 DE-52纖維素已停產(chǎn)無(wú)替代品的詳細(xì)介紹目前常用的離子交換纖維素列于下表DE-32 DE-52纖維素
DEAE -
纖維素形狀長(zhǎng)度
(微米)交換當(dāng)量
(毫克當(dāng)量 / 克)蛋白吸附容量 (毫克 / 克)床體積(毫升 / 克)
胰島素( pH8.5 )牛血清清蛋白( pH8.5 )pH6.0pH7.5
DE-22
DE-23
DE-32
DE-52
CM- 纖維素
CM-22
CM-23
CM-32
CM-52改良纖維性 *
同上(除細(xì)粒)
微粒性(干粉)
同上(溶脹)
改良纖維性
同上(除細(xì)粒)
微粒性(干粉)
同上(溶脹)12~400
18~400
24~63
24~63
12~400
18~400
24~63
24~631.0 ± 0.1
1.0 ± 0.1
1.0 ± 0.1
1.0 ± 0.1
0.6 ± 0.06
0.6 ± 0.06
1.0 ± 0.1
1.0 ± 0.1750
750
850
850
溶菌酶
(pH5.0)
600
600
1,260
1,260450
450
660
660
7S -γ球蛋白( pH5.0 )
150
150
400
4007.7
8.3
6.0
6.0
pH5.0
7.7
9.1
6.8
6.87.7
9.1
6.3
6.3
pH7.5
7.7
9.1
6.7
6.7
* :英國(guó) Whatman 廠的型號(hào),原來(lái)有舊型號(hào)如 DE-1 ,為長(zhǎng)纖維性,長(zhǎng)度 1000 微米。還有 DE-11 ,纖維性, 50 ~ 250
微米,對(duì)牛血清清蛋白的吸附容量?jī)H為 130 毫克 / 克。
Cellulose DE-52 纖維素 DE-52
二乙氨基乙基纖維素DE52
別名 DEAE 纖維素52 ;離子交換纖維素
英文名 Cellulose-DEAE,DE 52
分子式 離子交換基團(tuán)-OCH2CH2N(C 2H5)2
分子量
為已經(jīng)過(guò)泡脹的二乙氨基乙基纖維素,為中等堿度陰離子交換劑。對(duì)高相對(duì)分子質(zhì)量聚合電解質(zhì)有較好的解析。游離堿型。1kg 中約含有300g
干燥品。容量1mmol/g (干)。典型吸收值(胰島素相對(duì)分子質(zhì)量12000)850mg/g 、(牛血清蛋白)660mg/g。
柱色譜用吸附劑,分離提純蛋白質(zhì)、核酸、低相對(duì)分子質(zhì)量蛋白質(zhì)、酶、細(xì)胞碎片和細(xì)胞。
本品應(yīng)密封保存。
物理形態(tài)功能團(tuán)正常pH范圍小離子電量meg/dg(4)蛋白容積(1)mg/dg蛋白容積mg/ml柱體積每升所需的離子交換劑kg(2)柱床體積填料(3)密度dg/ml
DE-52二乙氨乙基2 -9.50.88 -1.08700 (b)1300.90.19 (e)
離子交換層析法是所有生物分子純化技術(shù)zui為簡(jiǎn)明、普通和方便的方法。
因而,Whatman
離子交換填料廣泛地用于從實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)到大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)。在生物分子純化領(lǐng)域已有三十多年的歷史了。填料適用于柱分離和分批分離。產(chǎn)品用高質(zhì)量纖維制成。
應(yīng)用:1、人絨促性素(HCG)建立了以pH
4.0、0.05mol/L醋酸鹽緩沖液溶解HCG粗品、經(jīng)人造沸石吸附和DEAE-纖維素(DE-52)柱純化的方法,HCG效價(jià)達(dá)3000U/mg以上,收率提高10%以上,且生產(chǎn)周期縮短,節(jié)約了乙醇用量
2、重組蛋白的純化:收集誘導(dǎo)表達(dá)后的菌體,溶于50mmol/L的咪唑鹽酸(pH 6.5)溶液,超聲波處理使菌體裂解,12
000×g30分鐘離心取上清,加樣于平衡好的DEAE-52纖維素層析柱,使用0~0.3 mol/L NaCl梯度洗脫,收集含重組16000蛋白管,用25
mmol/L Tris-醋酸透析后,上樣于平衡好的PEI(NH)柱,1
mol/L醋酸鈉洗脫,收集含重組16000蛋白管。3、IgG的簡(jiǎn)易快速提取法DEAE-纖維素直接提取法:取樣品直接過(guò)DEAE-纖維素柱。下面介紹的是zui為簡(jiǎn)單的燒杯法。
⑴ 以一定數(shù)量的DEAE52放入燒杯中,加入0.01Mol/L pH8.0PB緩沖液,靜置30min,去上清細(xì)粒,再重復(fù)一次。
⑵用布氏漏斗(內(nèi)放兩層濾紙)過(guò)濾。
⑶以5g濕重的DEAE-纖維素加1ml血清及3ml蒸餾水混合液的比例,加入各成分,充分?jǐn)嚢琛?br>⑷于4℃中放置1h,中間攪拌數(shù)次。
⑸用布氏漏斗抽濾,再用0.01Mol/L pH8.0PB緩沖液沖洗纖維素,抽濾。濾液即為提取的IgG液。
4、采用DEAE-52 纖維素柱層析法對(duì)脫蛋白.和脫色后的烏龍茶多糖進(jìn)行分離
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